Обзор

QuantiFERON-CMV - это диагностический тест in vitro, в котором используется пептидный коктейль, имитирующий белки цитомегаловируса человека (CMV). Обнаружение гамма-интерферона (IFN-γ) с помощью энзим-связанного иммуносорбентного анализа (ELISA) используется для выявления in vitro ответов на эти пептидные антигены, которые связаны с ЦМВ-инфекцией. Потеря этой иммунной функции может быть связана с развитием болезни ЦМВ. Предполагаемое использование QuantiFERON-CMV заключается в мониторинге уровня анти-ЦМВ иммунитета у лиц с риском развития заболевания ЦМВ.

QuantiFERON-CMV не является тестом для определения инфекции CMV и не должен использоваться для исключения инфекции CMV.

Тест-система QuantiFERON-CMV использует специальные пробирки для сбора крови, которые используются для сбора крови. Инкубация крови происходит в пробирках в течение 16-24 часов, после чего плазму собирают и проверяют на присутствие IFN, продуцируемого в ответ на пептидные антигены.

Какие пациенты с трансплантацией подвергаются риску пост-профилактики?

Современные иммуносупрессивные методы лечения, используемые для предотвращения отторжения трансплантированного органа, оказывают вредное воздействие на Т-лимфоциты и клеточно-опосредованные иммунные ответы у реципиентов трансплантата твердого органа. Эти пациенты имеют повышенную восприимчивость к вирусным инфекциям после трансплантации (2, 3). Приблизительно у половины этих пациентов наблюдаются признаки активной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции (т.е. вирусной репликации) после завершения профилактики (1).

Следовательно, связанные с ЦМВ заболеваемость и смертность у реципиентов трансплантата очень высоки (3–5). Инфекция может привести не только к органоспецифическим состояниям, поражающим мозг, легкие и печень, но также к оппортунистическим инфекциям, усиленному отторжению аллотрансплантата и смерти пациента. Эти связанные с ЦМВ осложнения добавляют приблизительно 49% к стоимости ухода за трансплантатом (6).

Иммунный статус реципиента трансплантата может влиять на (ре)активацию ЦМВ у реципиента трансплантата. Специфичный цитокиновый маркер для клеточных иммунных реакций, интерферон-гамма (IFN-γ) играет ключевую роль (7, 8). Выделенные из ЦМВ-специфических Т-клеток в ответ на антигены, связанные с ЦМВ-инфекцией (8, 9), уровни IFN-γ могут указывать на общий уровень клеточного иммунитета пациента.

Цитомегаловирус (ЦМВ) является наиболее распространенной и проблемной вирусной инфекцией у реципиентов твердых органов.

Как QuantiFERON-CMV может помочь идентифицировать пациентов из группы риска?

QuantiFERON-CMV использует специальные пробирки для сбора крови, которые покрыты пептидами, имитирующими CD8 + -специфичные эпитопы белков CMV, а также пробирки с отрицательным и положительным контролем. Стимуляция CD8 + T-клеток в 1 мл цельной крови пептидами CMV приводит к выработке IFN-γ у инфицированных людей. Затем используют энзим-связанный иммуносорбентный анализ (ELISA) для измерения количества IFN-γ, присутствующего в плазме каждой из 3 пробирок (контроль Nil, антиген CMV и контроль Mitogen). Сильный ответ IFN-γ в антигенной пробирке CMV указывает на иммунитет к CMV (11).

Исключение последствий, связанных с ЦМВ

Пациенты, которые имеют клеточный иммунный ответ на ЦМВ в конце профилактики, имеют значительно меньший риск развития болезни ЦМВ, чем те, у кого нет детектируемого иммунного ответа. Это указывает на то, что QuantiFERON-CMV может предсказать развитие болезни CMV с поздним началом у реципиентов трансплантата (8, 10–13).

Пациенты с реактивным результатом QuantiFERON-CMV остаются свободными от заболевания ЦМВ значительно чаще и дольше, чем пациенты с нереактивным результатом QuantiFERON-CMV после прекращения противовирусной профилактики.

Клиническая уверенность

QuantiFERON-CMV может помочь (13):

  • Прогнозировать риск новых и рецидивов заболевания ЦМВ
  • Обеспечить наиболее точное принятие терапевтических решений
  • Улучшить здоровье пациента

Тест QuantiFERON-CMV не является прямым тестом для определения инфекции ЦМВ и не должен использоваться исключительно для исключения инфекции ЦМВ.

Точность, эффективность и полезность QuantiFERON-CMV для мониторинга связанных с CMV изменениями в клеточном иммунитете была продемонстрирована в нескольких исследованиях (8, 10–13).

Новые международные согласованные методические принципы по выявлению ЦМВ в СОТ

В Международном консенсусном руководстве по лечению цитомегаловируса при трансплантации твердых органов (14) предполагается, что идеальный анализ иммунного мониторинга должен:

  • Оценить количество и функцию CD4 + и CD8 + T-клеток реципиента получателя
  • Уметь измерять ИФН-γ
  • Быть простым в использовании, экономически эффективным и воспроизводимым
  • Быстрое время выполнения тестирования
  • Быть легок в транспортировки в специализированные реферальные лаборатории

QuantiFERON-CMV соответствует практически всем критериям, указанным в приведенных выше рекомендациях (14).

В настоящее время исследования подчеркивают, что мониторинг уровня клеточного иммунитета пациента к ЦМВ с помощью QuantiFERON-CMV может помочь определить оптимальную продолжительность дорогостоящей антивирусной терапии у пациентов с высоким риском (8, 10, 11, 13–16).

Технология QuantiFERON - это уникальный подход к обнаружению и мониторингу заболеваний - единственная технология диагностики in vitro, доступная для обнаружения клеточно-опосредованных иммунных ответов из образцов цельной крови.

Люди, подвергшиеся воздействию ЦМВ и других заболеваний, имеют специфические Т-лимфоциты в крови. Эти Т-клетки являются банком памяти иммунной системы человека, распознавая антигены, которым Т-клетки подвергались ранее. Когда специфический для заболевания антиген комбинируется с кровью индивидуума, который подвергался этому заболеванию, происходит быстрая рестимуляция Т-клеток со специфической памятью об этом антигене. Эти антигенспецифические Т-клетки отвечают за секрецию IFN-γ, которая может быть измерена как специфический маркер иммунного ответа против этого антигена заболевания.

Рекомендации

  1. Paya, C. et al. (2004) Am. J. Transpl. 4, 611.
  2. Smyth, R.L. et al. (1991) Transplantation 52, 480.
  3. Boeckh, M. and Nichols, W.G. (2003) Herpes 10, 12.
  4. Gandhi, M.K. and Khanna, R. (2004) Lancet Infect. Dis. 4, 725.
  5. Humar, A., Gillingham, K., Payne, W.D., Sutherland, D.E. and Matas, A.J. (2000) Transplantation 70, 310.
  6. Kim, W.R. et al. (2000) Transplantation 69, 357.
  7. Sylwester, A.W. et al. (2005) J. Exp. Med. 202, 673.
  8. Walker, S. et al. (2007) Transpl. Infect. Dis. 9, 165.
  9. Westall, G. Kotsimbos, T. and Brooks, A. (2006) Am. J. Transpl. 6, 577.
  10. Westall, G.P., Mifsud, N.A. and Kotsimbos, T. (2008) Am. J. Transpl. 8, 1749.
  11. Kumar, D. et al. (2009) Am. J. Transpl. 9, 1214.
  12. Singh, N.J. (2006) Clin. Virol. 35, 474.
  13. Danziger-Isakov, L.A. et al. (2003) Transplantation 75, 1538.
  14. Kotton, C.N. et al. (2013) Transplantation 96, 333.
  15. Danziger-Isakov, L. and Heeger, P.S. (2009) Am J Transpl 9, 987.
  16. Crough, T. and Khanna, R. (2009) Clin Micro Reviews 22, 76. Antigen presenting cell (APC)